透骨消痛胶囊对膝骨关节炎大鼠内质网应激影响的研究

摘要：目的：观察透骨消痛胶囊对膝骨关节炎大鼠软骨内质网应激的影响，探讨透骨消痛胶囊治疗骨关节炎的可能机制。方法：将30只清洁级SD大鼠随机分为正常对照组，模型对照组，透骨消痛胶囊高、中、低剂量组，每组6只。除正常对照组外，其余各组采用质量分数为4%的木瓜蛋白酶注射建立大鼠膝骨关节炎模型。给药8周后，收集大鼠右侧股骨髁和胫骨平台，光镜检查软骨组织的形态学变化，利用原位末端标记法（TdT-mediated dUTP nick-end labeling,TUNEL）检测软骨细胞凋亡情况，免疫组化检测软骨组织内质网应激蛋白激酶（PKR-like ER kinase,PERK）、真核启动因子2α（eukaryotic translation initiation fac-tor 2α,eIF2α）、转录活化因子4（activating transcription factor 4,ATF4）、免疫球蛋白结合蛋白（immunoglobulin binding protein,Bip）、生长抑制 DNA 损伤基因153（growth arrest and DNA-damage-inducible gene 153, GADD153）、软骨细胞功能基因Ⅱ型胶原蛋白（Collage Ⅱ）和转录因子 SOX-9蛋白的表达。结果：透骨消痛胶囊对大鼠骨关节炎模型关节软骨的大体外观及 HE 染色均有明显改善，TUNEL 结果显示其能够降低软骨细胞凋亡指数（P <0.01），免疫组化结果显示透骨消痛胶囊较模型对照组能够下调 PERK、eIF2α、ATF4、Bip 及 GADD153蛋白表达，上调软骨细胞功能基因 Collage Ⅱ和 SOX-9的蛋白表达（P <0.05或 P <0.01）。结论：透骨消痛胶囊可通过抑制内质网应激的信号转导，减少软骨细胞的凋亡数目，改善软骨细胞形态，促进软骨细胞代谢及软骨修复，以维持软骨结构的相对完整，从而延缓关节软骨退变。